注意事項：產(chǎn)品僅用于科研1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱(chēng)：鴨乙型肝炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 
規格： 50次
貨號：BK-P97070
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據保守區設計引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實(shí)現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
   2.   重現性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗菌株的驗證，重現性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現對其的直接檢測，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
   4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過(guò)程中不會(huì )出現任何的假陽(yáng)性及假陰性報告結果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對照。
2. 標記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實(shí)驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
無(wú)水硫酸銅  Copper(II) sulfate, anhydrous  分子式：CuSO4，  分子量：159.61

無(wú)水碳酸鈣  Calcium carbonate, anhydrous  分子式：CaCO3      分子量：100.09

戊二酸酐  Glutaric anhydride  分子式：C5H6O3，  分子量：114.1

新戊二醇  2,2-Dimethyl-1,3-propanediol  分子式：C5H12O2，  分子量：104.15

溴化鉀  Potassium bromid
即用型TBS溶液  TBS buffer 10xSolution  分子式：      分子量：

快速高效離心柱式蛋白濃度定量  SPN? Protein Assays   分子式：      分子量：

膠板清洗劑  GELPLATE-clean? Refil  特點(diǎn)：Suitable for sequencing and protein electrophoresis gel plates. Removes proteins nucleic acids fats lipids radioisotopes and other contaminants from electrophoresis gel plates. Application for cleaning electrophoresis plates.  說(shuō)明：Clean your electrophoresis plates with GELPLATE-Clean? and prevent poor electrophoretic band migration, band distortions, and poor image development. Simply spray and wipe clean your electrophoresis plates with GELPLATE-Clean.

0脂酶A2   Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom  用途及描述：科研試劑，由鈣離子激活，由鋅，鋇和錳離子抑制。在25℃，pH8.9時(shí)，從大豆卵0脂中每分鐘1單位本產(chǎn)品釋放1mol酸。  儲存條件：2~8℃，避光防潮密閉干燥。

硫辛酸琥珀酯  Thioctic Acid NHS Ester  分子式： C12H17NO4S2      分子量：
正釩酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium orthovanadate，級別：CP，規格：500克  HumanCyclin-D1ELISAKit 人細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Mineraloil 100ml/500ml/1L原裝 Sigma M8410  humanHistocompatibility2-K1-Kregion,H2-K1ELISA試劑盒人組織相容性2-K1-K區(H2-K1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2-Hexanone基25克CP，99.5%  組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

本晴 Bqnzonitnilq 100-47-0  Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Driselase崩潰酶25克BR，2000-6000U /mg，Type VI  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鴨乙型肝炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒氧化銪shēng huà shì jì容量：RT25克  兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(細胞分離液)  Human platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F  Humandenguefeveraibody,DFELISAKit 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒 96T