當前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次豬圓環(huán)病毒2型探針?lè )晒舛縋CR試劑盒
簡(jiǎn)要描述:豬圓環(huán)病毒2型探針?lè )晒舛縋CR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品MDA-MB-436人腺癌細胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養基+10%FBS右美沙芬-d3Dextromethorphan-d3質(zhì)量規格:美國進(jìn)口FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標簽)貝沙羅汀-d4Bexarote
產(chǎn)品分類(lèi)
詳細介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應,無(wú)非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng):豬圓環(huán)病毒2型探針?lè )晒舛?/span>PCR試劑盒
產(chǎn)品規格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P97062
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門(mén)。
原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過(guò)內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定,受環(huán)境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。
實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準確的名稱(chēng)和ID號;
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設計的引物來(lái)指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
硝氮黃 Nitrazine yellow 分子式:C16H8N4Na2O11S2 分子量:542.36
溴百里香酚藍 Bromothymol blue 分子式:C27H28Br2O5S 分子量:624.38
溴酚藍 Bromophenol blue 分子式:C19H10Br4O5S 分子量:669.96
亞甲蘭,亞甲基藍 Methylene Blue 分子式:C16H18ClN3S?3H2O 分子量:319.85(無(wú)水)
乙基紫 Ethy
健那綠B Janus Green B 分子式: C30H31ClN6 分子量:511.06
金胺O Auramine O 分子式:C17H21N3.HCl 分子量:303.83
卡拉唑黑E Chlorazol black E 分子式:C34H25N9Na2O7S2, 分子量:781.73
考馬斯亮藍R250 Brilliant Blue R 分子式:C45H44N3NaO7S2 分子量:825.97
麗春紅2R Ponceau 2R 分子式:C18H14N2Na2O7S2 分子量:480.42
脂多糖,英文名或英文縮寫(xiě):LPS,級別:高純,98%,規格:500U Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISA試劑盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2’-Deoxy-D-Ribose 1g原裝/5g原裝/10g原裝 INALCO1521/31 組織WNV(WESTNILE)病毒定性檢測試劑盒20次
紡錘菌素,英文名或英文縮寫(xiě):Netropsin dixy7nochloride,級別:BR,50u/mg,規格:100克 HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
巴豆全(劇讀) CROTONcLDqHYDq 兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
UREA尿素超純級白色粉末RTsigma Human serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
豬圓環(huán)病毒2型探針?lè )晒舛?/span>PCR試劑盒一水醋酸銅,英文名或英文縮寫(xiě):Cupric acetate monohydrate,級別:CP,規格:50克 生長(cháng)激素釋放肽(Ghrelin)ELISA試劑盒 ,英文名: Ghrelin ELISA Kit
4-89-5,水溶液40%metxYLAMINE PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒豬內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
飽和緩沖液,英文名或英文縮寫(xiě):Saturated picric acid Buffer
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