當前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次鴨瘟病毒PCR試劑盒
簡(jiǎn)要描述:鴨瘟病毒PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉移) KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS重水,氧化氘(50G)Deuterium Oxide質(zhì)量規格:D,99.9%SF763細胞,人腦瘤細胞 肺炎克雷伯菌 人顱骨造骨細胞總RNAHCO
產(chǎn)品分類(lèi)
詳細介紹
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng):鴨瘟病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品規格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P97033
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應,無(wú)非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過(guò)內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定,受環(huán)境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。
實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準確的名稱(chēng)和ID號;
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設計的引物來(lái)指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
油酸鈉 Sodium oleate 分子式:C18H33O2.Na 分子量:304.44
玉米烯酮;赤霉烯酮 Zearalenone from Giberella zeae 分子式:C18H22O5 分子量:318.36
愈創(chuàng )木酚縮水甘油醚 Guaiacol glycidyl ether 分子式:C10H12O3 分子量:180.20
月桂?;“彼徕c Sodium lauroyl sarcosine 分子式:C15H28NNaO3 分子
0酸三鈣 Calcium phosphate, tribasic 分子式: Ca3(PO4)2 分子量:310.18
硫代硫酸鈉無(wú)水 Sodium thiosulfate anhydrous 分子式:Na2S2O3, 分子量:158.11
分子式:NH4SCN Ammonium thiocyanate 分子量:76.12 物理性狀及指標:
硫酸銨 Ammonium sulfate 分子式:(NH4)2.SO4;H8N2O4S 分子量:132.13
硫酸鉍 Bismuth (III) sulfate 分子式:Bi2(SO4)3, 分子量:706.15
紫脲酸20毫升 組織總巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次
36404-88-32-錄-3-甲醛2-Chloro-3-pyridinecarboxaldehyde HumanFolicacid,FAELISAKit人葉酸(FA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
shēng huà shì jì容量:500克 人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,4-二安基本磺醋 2,4-Dicminobqnzqnqsulfonic ccid 88-63-1 豬甘油-3-脫氫酶(GAPDH)免疫試劑盒 Pig Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
移液器P50shēng huà shì jì容量:1克 HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鴨瘟病毒PCR試劑盒乙二四乙酸鈣二鈉,英文名或英文縮寫(xiě):EDTA-2NaCa,級別:BR,50%,規格:5克 Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Mannase 50mg/100mg/500mg原裝 Yakult.JAPAN 人類(lèi)白細胞抗原A(HLA-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Aminoblack10B奈酚藍10毫升超純,98% 小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒 Mouse teta
PCR實(shí)驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
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