注意事項：產(chǎn)品僅用于科研1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱：馬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 
規(guī)格： 50次
貨號：BK-P96851
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
茜素黃GG Alizarin yellow GG 584-42-9 25G 通用試劑  Humanserineprotease，PRSSELISAKit人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
依諾沙星(水溶性）質量規(guī)格：依諾沙星含量≥60%Enoxacin  大鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒RatEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T  Humanai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧氟沙星質量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng) Ofloxacin  人氨酸轉氨酶/谷轉氨酶(ALT/GPT)試劑盒 Human ALT/GPT ELISA Kit  Humancardioophln1,CT-1ELISAKit人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧氟沙星（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Ofloxacin  Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

阿巴卡韋  質量規(guī)格：>99%,BRAbacavir  NAD濃度比色法定量檢測試劑盒20/80  兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒 Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit
四甲基氯化銨(>99%,BR)質量規(guī)格：>99%,BRTetramethylammonium chloride  英文名稱RatTATELISAKit大鼠凝血酶-抗凝血酶復合物(TAT)規(guī)格：96T/48T  犬瘟熱病毒(CDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1-辛烷磺酸鈉(>98%,BC )質量規(guī)格：>98%,BC 1-Octanesulfonic acid,  salt  活體組織氧化應激活性氧(ROS)高質綠色熒光測定試劑盒8/20  山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)試劑盒 Goat glathione reductase,GSR ELISA kit

乙酸鈣一水(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BRCalcium acetate, monohydrate  ELISAKitCYP21A人細胞色素P450c21A/21-羥化酶規(guī)格：48T/96T  內(ET)ELISA試劑盒 ，英文名： ET ELISA Kit

肝素鈉/肝1脂鈉鹽質量規(guī)格：細胞培養(yǎng)級，效價≥180IU/mgHeparin   小鼠鈣離子轉運ATP酶A2(ATP2A2)ELISA試劑盒 ，英文名： ATP2A2 ELISA Kit  Rat17-ketosteroids,17-KSELISA試劑盒大鼠17-同類(17-KS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
馬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒人腎皮質上皮細胞裂解物HRCEpiCL馬鈴薯浸出芬，英文名或英文縮寫：Potato extract，級別：超，98%，規(guī)格：25U

IFNGR2 Others Mouse 小鼠 IFNGR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍錄米 ≥99% BqCLOMqTHcSONq 4419-39-0

BHK-21 [C-13] 倉鼠腎成纖維細胞2-錄-4-硝基本-α-L-巖藻糖苷，英文名或英文縮寫：CNP-Afu，級別：標準溶液，100ug/ml，規(guī)格：100克

CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)5×10