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簡(jiǎn)要描述:天凈沙DNA釋放劑及公司相關(guān)產(chǎn)品乳酸過(guò)氧化物酶,英文名或英文縮寫(xiě):Lactoperoxidase from bovine milk,級別:0.2OD/each primer,規格:1克 Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISA試劑盒人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規格:96T/48T9003-1-4聚酸Pol
產(chǎn)品分類(lèi)
詳細介紹
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng):天凈沙DNA釋放劑
產(chǎn)品規格: 詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號:BK-P96560
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應,無(wú)非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過(guò)內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定,受環(huán)境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。
實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準確的名稱(chēng)和ID號;
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設計的引物來(lái)指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
氫氧化鈣500克 HumanOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 人骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
硝氮黃Nitrazine yellow質(zhì)量規格:IND 犬游離狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Canine Free i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit 人血管內皮細胞生長(cháng)因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
中性紅Neutral red質(zhì)量規格:BS 英文名稱(chēng)MouseBLC-1/CXCL13ELISAKit小鼠B-細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規格:96T/48T 豬生長(cháng)抑素(SS)試劑盒 Porcine Somatostatin,SS ELISA Kit
橙黃ⅣOrange Ⅳ質(zhì)量規格:IND 冰凍切片組織線(xiàn)粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒50 HumanLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 人白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
紫花前胡苷(標準品)Nodakenin質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品 RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISA試劑盒大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒規格:96T/48T HumanMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISA試劑盒人巨噬細胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
前腎上腺髓質(zhì)素(1-20),人Proadrenomedullin (1-20)(human)質(zhì)量規格:>95%,BR 人色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA檢測試劑盒Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 96T/48T ELISAKitLF/LTF兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白規格:48T/96T
前腎上腺髓質(zhì)素(45-92),人Proadrenomedullin (45-92)(human)質(zhì)量規格:>95%,BR 大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit GoatP-Selectin/CD62P/GMP-140ELISAKit山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒規格:96T/48T
蛋白激酶C(19-31)Protein Kinase C (19-31)質(zhì)量規格:>95%,BR 英文名稱(chēng)RatansferrieceptorELISAKit大鼠轉鐵蛋白受體(TFR)規格:96T/48T 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
PLX4720PLX-4720質(zhì)量規格:>98%,B-RafV600E抑制劑 鈣交換體NCX蛋白表達檢測試劑盒20 小鼠NADPH氧化酶1(NOX1)試劑盒 Mouse NADPH oxidase 1,NOX1 ELISA kit
天凈沙DNA釋放劑N.N-二基十二安-N-氧化物 LDcO 1643-0-2 冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
PCR實(shí)驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
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