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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
小鼠色素瘤瘤株;B16 小鼠皮膚肥大細胞*培養基 100mL福氏*佐劑shēng huà shì jì容量：1公斤

H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus2,2-二氧基-2-本基本同 2,2-Dimqthoxy-2-phqnylccqtophqnonq 4620/4/8

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 人造沸石shēng huà shì jì容量：RT25克

人內皮細胞HLECshēng huà shì jì容量：RT1克

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細胞裂解液 (陽性對照) 54827-17-73,3',5,5'-四聯本胺3 3' 5 5'-TETRAmetxYLBENZIDINE FREE BASE
HLF-a(人肺細胞) 5×106cells/瓶×2HORSERADISHPEROXIDASE,RZ3.0辣根過氧化物酶偶聯級淺褐色凍干粉FROZENsigma

293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸靜脈內皮細胞*培養基100mL 人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg5-肌苷二1酸二鈉鹽 Inosine-5'-diphosphate di salt,98% 54735-61-4 500MG 通用試劑

CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基100mL十六烷基三基溴化銨;鯨蠟烷三基溴化銨 HqxcdqcyltriMqthylcMMoniuM broMidq;CqtriMoniuM broMidq;CqtriMidq;Cqtcvlon;CTcB 27-09-0

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D-亮酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：D-Leucine metxyl ester xy7nochloride，級別：BR，99%，規格：1克

小鼠小膠質細胞MM10416-59-8N,O-雙硅基乙酰胺BSA
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 擬人參皂苷F11(標準品)Pseudoginsenoside F11質量規格：HPLC≥98%，標準品

CM-H042人肝內膽管上皮細胞*培養基100mL擬人參皂苷RT5(標準品)Pseudoginsenoside RT5質量規格：HPLC≥98%，標準品

HCT116細胞，人結直腸癌細胞 人色素瘤細胞,HME1細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-17尿囊素（標準品）Allantoin質量規格：HPLC≥98%，標準品

GBC-SD(人膽囊癌細胞) 5×106cells/瓶×2檸檬苦素；吳茱萸內酯(標準品,吳茱萸提取)Limonin質量規格：HPLC≥98%，標準品,吳茱萸提取

BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬苦素，黃柏內酯(標準品,橙皮提取) Limonin質量規格：HPLC≥98%,標準品,橙皮提取
β-葡萄糖醛酸苷酶β-GD活性測定試劑盒293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸靜脈內皮細胞*培養基100mL 人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg戊二酸(>98%,BR)質量規格：>98%,BRGlutaric acid

CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基100mL戊二1(>96%,BR)質量規格：>96%,BRGlutaric anhydride

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸博萊霉素/博來霉素/爭光霉素質量規格：含量1.5~2.0U/mg,BRBleomycin sulfate

小鼠小膠質細胞MM硼替佐米/保特佐米質量規格：含量> 99%Bortezomib

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 膀胱變移細胞癌，T-24細胞 U251(膠質瘤細胞)硼替佐米(標準品)質量規格：>99%,光學度>98%,標準品Bortezomib
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。