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轉氫酶1測試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:轉氫酶1測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:含1%棉籽糖的PY培養基 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規格:1ml*20支 梭菌屬測定用培養基 英文名稱(chēng):Clostridium Test Medium 產(chǎn)品規格:250g 硫酸慶大 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規格:1ml*5支 液體硫乙醇酸鹽培養基管 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規格:20ml*10支

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1314

詳細介紹

實(shí)驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線(xiàn)計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類(lèi)及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長(cháng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗室提供免費代測,7個(gè)工作日出結果,提供原始數據!

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

檢測方法

貨號

轉氫酶1測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6565

商品介紹:

測定意義:

TH位于線(xiàn)粒體的內膜上,又稱(chēng)為線(xiàn)粒體復合體六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互轉化,調節線(xiàn)粒體NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反應稱(chēng)為TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH。

測定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來(lái)計算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細胞和組織的差異會(huì )比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻獑?dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽(yáng)性對照或作為對SOD活性定量的參考。

腸球菌、溶血性鏈球菌和糞鏈球菌檢驗培養基  

50次 DNA電泳分子量標準(λDNA/EcoR I+ Hind III) DNAMETER(3) 4℃保存

2 ug pGEX-4T- 2 pGEX-4T- 2 低溫運輸,-20℃保存

PPLO瓊脂 PPLO Agar 250g

1瓶 G401細胞株 G401 低溫運輸和保存

225ml布氏肉湯均質(zhì)袋 Brucella Broth 10個(gè)/包

2000 U 限制性?xún)惹蠬indIII Restriction Endonuclease -20℃保存

50mL Prehybridization Solutions in SSPE  Prehybridization Solutions in SSPE  常溫保存

10mL 溶液,50mg/mL Tetracycline HCl Solution -20℃保存

2 ug pQE-32 pQE-32 低溫運輸,-20℃保存

250mL 非凍型組織RNA保存液 RNALOCKER 常溫

轉氫酶1測試盒微量法PILR beta  細胞表面受體PILRβ抗體 規格: 0.2ml

IL-6R Beta/CD130/gp130  白細胞介素6受體β抗體IL-6Rβ 規格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG/AP  堿性磷酸(AP)標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.1ml

BAT5  白細胞抗原B相關(guān)轉錄蛋白5抗體 規格: 0.2ml

MEOX 2  間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體 規格: 0.2ml

phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)  磷酸化高遷移率核小體結合蛋白1 規格: 0.1ml

BCSC1  抑蛋白抗體 規格: 0.2mlComplement C3 beta chain  補體C3b抗體 規格: 0.1ml

phospho-JunB(Ser79)  磷酸化活化蛋白激B抗體 規格: 0.1mlGDPD5  甘油磷酸二酯磷酸結構域5抗體 規格: 0.2ml

RPS6KA1/p90RSK/RSK1  絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規格: 0.1mlTIP47/M6PRBP1  脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體 規格: 0.2ml

CDC2L5  細胞分裂周期2樣蛋白激5抗體 規格: 0.2mlPolyprotein(Hepatitis G Virus)  庚型毒多聚蛋白抗體 規格: 0.1ml

IGF2BP3/IMP3  胰島素樣生因子ⅡmRNA結合蛋白3抗體 規格: 0.1mlCSFV Polyprotein  豬瘟毒抗體 規格: 0.1ml

EDG3  內皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 規格: 0.2mlC16orf57  16號染色體開(kāi)放閱讀框57抗體 規格: 0.2ml

 


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