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磷脂酶A2(PLA2)測試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:實(shí)驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線(xiàn)計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1206

詳細介紹

實(shí)驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線(xiàn)計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類(lèi)及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長(cháng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗室提供免費代測,7個(gè)工作日出結果,提供原始數據!

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

檢測方法

貨號

磷脂酶A2(PLA2)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6659

商品介紹:

測定意義:

磷脂酶A2EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷?,廣泛存在于動(dòng)植物組織、細菌、細胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細胞信號傳遞、脂質(zhì)過(guò)氧化修復、宿主反應等生理過(guò)程,在控制體內磷脂類(lèi)物質(zhì)平衡、調節機體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著(zhù)及其重要的作用。

測定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗用品及儀器

天平、超速冷凍離心機、研缽、可見(jiàn)分光光度計、微量石英比色皿。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細胞和組織的差異會(huì )比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻獑?dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽(yáng)性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pcDNA3.1(hyg)+ pcDNA3.1(hyg)+ 低溫運輸,-20℃保存

馬鈴薯瓊脂培養基 Potato Agar Medium 250g

100g 麥芽提取物 Malt Extract 室溫保存

50T 腦膜炎病毒多重PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100 mg 5(6)-CFDA Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

100mL Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0   Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0   常溫保存

20次 Southern Marker DL2000(DIG)  

2 ug pGEX-6P-2 pGEX-6P-2 低溫運輸,-20℃保存

美國藥典培養基(USP標準)  

1瓶 H4-II-E-C3細胞株 H4-II-E-C3 低溫運輸和保存

TSA表面接觸皿55mm  10個(gè)每包

磷脂酶A2(PLA2)測試盒微量法Acetyl-Histone H4(K12)  乙?;M蛋白H4抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/APC  APC標記的兔抗馬IgM 規格: 0.1ml

PHLDA1/TDAG51  T淋巴細胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體 規格: 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/Cy5  Cy5標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml

Phospho-NMDAR2B (Tyr1070)  磷酸化谷受體2B抗體 規格: 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗羊IgG 規格: 0.1ml

CRYZL1  醌氧化還原樣蛋白1抗體 規格: 0.2mlPAR-2  蛋白激活受體-2抗體 規格: 0.1ml

p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain  細胞色素b245輕鏈抗體 規格: 0.1mlPhospho-HP1(Tyr43)  異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體(果蠅) 規格: 1ml

Clathrin heavy chain/Clathrin HC  網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 0.2mlSNX27  SNX27蛋白抗體 規格: 0.2ml

HMGCR  三羥基三甲基輔A還原抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgM 規格: 0.1ml

BMPER  BMP內皮細胞調節蛋白抗體 規格: 0.2mlCCDC83  卷曲螺旋結構域蛋白83抗體 規格: 0.2ml

IgHV/IgH  免疫球蛋白重鏈可變區抗體 0.2mlphospho-IRS1(Ser312)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規格: 0.1ml

CYP27A1  27α羥化抗體 規格: 0.2mlMLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP  卡波西氏肉瘤皰疹毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規格: 0.1ml

AAT1/C3orf15  3號染色體開(kāi)放閱讀框15抗體 規格: 0.2mlNCX2/SLC8A2  鈉鈣交換蛋白2抗體 規格: 0.1ml

POLA2  DNA聚合α2抗體 規格: 0.2mlHAVCR1/TIM1  損傷分子1抗體(甲型毒細胞受體1) 規格: 0.1ml

 


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