注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人I型膠原蛋白（COL-1）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

人IκB激酶-α（ IKKα）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人H鈣粘連蛋白（HCDH13）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

人H-ras ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人H1N1 抗體（IgG）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人E鈣粘著(zhù)蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

四輻射鳥(niǎo)圓線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測試劑盒規格磷酸化端粒酶逆轉錄酶抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：phospho-TERT(Ser1125)

腫瘤易感基因101蛋白抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：Tsg101

磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：phospho-Tau protein(Thr205)

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體（M亞家族） 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：TRPM5

線(xiàn)粒體外膜受體Tom20抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：TOM20

泛素特異性蛋白酶1抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：USP1

血管非炎癥分子1抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：VNN1

01群小川型霍亂弧菌抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：V.cholera Ogawa

賴(lài)氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：WNK1

鋅指蛋白Zdhhc12抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：ZDHHC-12

鋅指蛋白415抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：ZNF415

5-羥色胺受體2C抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：5HT2C Receptor

染色體結構維持蛋白1抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：SMC1

相關(guān)抗原17抗體 規格： 0.2ml  英文名稱(chēng)：SPAG17

磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 規格： 0.1ml  英文名稱(chēng)：phospho-SYN1(Ser549)

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應用，并逐步應用于臨床。