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簡(jiǎn)要描述:人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:酪蛋白氨基酸/酪蛋白水解物/Casamino acidBR100/500克國產(chǎn)/進(jìn)口WORT湯/WORT Broth真菌和酵母菌的培養250克國產(chǎn)/進(jìn)口7.5%鈉湯/7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養基100mL
詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家 | Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1)IRTPCR | BK-P9277 |
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現,DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。
BEL-7402(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
蘇木素染色規格:100ml
改良LETHEEN瓊脂基礎/LETHEEN Agar Base Modified妝品中微生物檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口
醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani人胎盤(pán)滋養層細胞*培養基
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
綠色木霉 Trichoderma viride釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
抗生素Ⅱ號培養基(PH7.8-8.0)/抗生素2號培養基(PH7.8-8.0)/Antibiotic Agar NO.2克林霉素、林可霉素等藥品的效價(jià)測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
牛浸膏/牛膏/小牛浸膏/牛抽提物/Meat extracts beefBR500克國產(chǎn)/進(jìn)口
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家馬鈴薯葡萄糖水 規格: 250g 用途: 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的檢驗。(GB)
B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)重組蛋白 Recombinant B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2 (LAB7-2)
促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)
極低密度脂蛋白受體(VLDLR)重組蛋白 Recombinant Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR)
視黃醇結合蛋白3(RBP3)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 3, Interstitial (RBP3)
整合素β3(ITGβ3)重組蛋白 Recombinant Integrin Beta 3 (ITGb3)
Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
BC3H1(小鼠腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人低分化前胃細胞 BGC-823
Swiss albion小鼠胚胎成纖維細胞 3T6
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) PC-12(低分化)
脫羧酶對照試驗培養基/Decarboxylase Control Medium脫羧酶試驗性對照(無(wú)氨基酸)5克國產(chǎn)/進(jìn)口
酪蛋白氨基酸/酪蛋白水解物/Casamino acidBR100/500克國產(chǎn)/進(jìn)口
WORT湯/WORT Broth真菌和酵母菌的培養250克國產(chǎn)/進(jìn)口
7.5%鈉湯/7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養基100mL
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