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簡(jiǎn)要描述:豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:暫無(wú) Williopsis saturnusNG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)漏斗狀側耳 Pleurotus sajor-caju樹(shù)狀假絲酵母 Candida arborea食管厚孢根霉人羊膜上皮細胞人結腸耐奧沙利鉑耐藥株
詳細介紹
技術(shù)原理:
DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現,DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Haemophilus suisPCR | BK-P9234 |
原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;?
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
WORT瓊脂/WORT Agar用于真菌,特別是酵母菌的計數和增菌培養250克國產(chǎn)/進(jìn)口
銀耳 Tremella fuciformis化沙雷氏菌 Serratia liquefaciens
酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白介素4(IL4)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Interleukin 4 (IL4)
三糖鐵瓊脂(TSI) 規格: 250g 用途: 用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞英文名稱(chēng):DH82
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus雜色云芝 Polystictus versicolor
Bolton肉湯配套試劑 規格: 10支/盒 用途: 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎中
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2
克雷伯氏顯色培養基250克國產(chǎn)/進(jìn)口
豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格粗柄羊肚菌 Morchella crassipas異常漢遜酵母 Hansenula anomala
人小氣道平滑肌細胞*培養基棕褐小單孢菌 Micromonospora brunnea
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞葛根素
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis葡萄汁有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum貝葉多孔菌
Calu-1(人肺細胞)吳茱萸堿
爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠腸巨噬細胞*培養基
尿素八疊球菌 Sarcina ureae小紅酵母 Rhodotorula minuta
DAB Kit/DAB顯色試劑盒涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusNEC(人食管細胞)
鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.植物桿菌 Lactobacillus plantarum
Western中低分子量蛋白Marker苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
暫無(wú) Williopsis saturnusNG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)
漏斗狀側耳 Pleurotus sajor-caju樹(shù)狀假絲酵母 Candida arborea
食管厚孢根霉
人羊膜上皮細胞人結腸耐奧沙利鉑耐藥株
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