技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應用，并逐步應用于臨床。

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

人顱蓋造骨細胞*培養基SK-CO-1(人結直腸腺細胞)

菜豆瘤菌 Rhizobium phaseoli綠木霉

光滑青霉釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠視網(wǎng)膜muller細胞100mL

人關(guān)節軟骨細胞*培養基100mL

蛛毒素受體3(LPHN3)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Latrophilin 3 (LPHN3)

5%糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum

D/E中和瓊脂/D-E中性瓊脂/戴伊恩格利中和瓊脂/ D/E Neutralizing Agar衛生環(huán)境中微生物的分離培養, 消毒效果測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

SMMC-7721(人肝細胞)臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus

透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖)1mL

口蹄疫病毒通用PCR檢測試劑盒價(jià)格甲磺酸鉀  134.2  Potassium methyl sulfonic acid*：2386-56-3分子量： CH3KO3S

(R)-3-甲酸甲酯酸    (R) -3- methyl piperidine hydrochloride*：分子量：

4-N-BOC-  200.28  Aminopiperidine 4-N-BOC-*：73874-95-0分子量： C10H20N2O2

1-溴-2,3,4,6-四氟  140.1118032  1- -2,3,4,6- four fluoro bromide*：1559-86-0分子量： C7H5FO2

9B,11B-環(huán)氧-16B-甲孕甾-1,4-二-17A,21-二-3,20-二酮  9B, 11B-, -16B-, -17A, -1,4-, 21-, -3,20- two,,  370.44分子量： C22H28O5*：981-34-0

乙酸鍶  214.71  Strontium acetate*：543-94-2分子量： C4H6O4Sr·1/2H2O

402有機擔體  402 organic body  分子量：*：

2--5-氯-3-甲吡  142.59  2- amino -5- -3-*：20712-16-7分子量： C6H7ClN2

4'-正丁-4-聯(lián)(4CB)  235.32  4'- butyl -4- cyano biphenyl (4CB)*：52709-83-8分子量： C17H17N

2-溴-5-甲醛噻唑  192.03  2- -5- bromine base thiazole formaldehyde*：464192-28-7分子量： C4H2BrNOS

N-甲磺酰氮丙    N- toluene, methyl chloride*：3634-89-7分子量： C9H11NO2S