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當前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測試劑盒  >  50次球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

簡(jiǎn)要描述:球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:胎盤(pán)堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

棕櫚?;さ鞍?(MPP2)重組蛋白 Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 2

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-16
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:369

詳細介紹

原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

貨號

 球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家

 Coccidioidesspp.PCR

BK-P9017

?
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現,DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。

Hela S3(人宮頸細胞)小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)

小鼠成骨細胞*培養基100mL

小鼠白血病細胞英文名稱(chēng):L1210

WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

HT-29, 人結腸細胞

褐球固氮菌 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis鏈霉菌 Streptomyces sp.

人胃細胞異常漢遜酵母 Hansenula anomala

豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida

人非小細胞肺細胞英文名稱(chēng):NCI-H358

鈉結晶紫增菌/Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth副溶血弧菌的選擇性增菌培養250克國產(chǎn)/進(jìn)口

球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家人食管細胞  Eca-109

中華鱉心肌來(lái)源細胞  CSSTH1

亞酸鹽增菌液/SE增菌液/SE培養基/Selenite Enrichment Medium增殖標本中的沙門(mén)氏菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口

明膠培養基/Gelatin Medium細菌明膠液化試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口

碘溶液(碘和碘化鉀混合溶液)/Iodine(Potassium Iodide Mixed Solution)四硫磺酸鈉亮綠增菌液配套試劑50毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

HT混合鹽/HT Media Supplement (50×) Hybri-Max™γ射線(xiàn)滅菌1vailSigmaH0137原裝

人腎皮層上皮細胞*培養基100mL

大鼠海馬神經(jīng)元細胞*培養基100mL

察氏培養基 規格: 250g 用途: 用于培養能以硝酸鹽作為氮源的真菌和細菌,及青霉和霉等霉菌的分離培養和形態(tài)鑒別

血平板 規格: 90mm×20個(gè) 用途: 用于營(yíng)養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-2010,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2...

Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白  Recombinant Juxtanodin (JN)

凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)重組蛋白  Recombinant Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 (APAF1)

窖蛋白(CAV1)重組蛋白  Recombinant Caveolin 1 (CAV1)

胎盤(pán)堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白  Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

棕櫚?;さ鞍?/font>2(MPP2)重組蛋白  Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 2 (MPP2)

NCI-H292(人肺細胞)5×106cells/瓶×2

 

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