原理是由一對引物介導，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

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實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應用，并逐步應用于臨床。

ZR-75-1(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis費氏中華瘤菌 Sinorhizobium fredii

NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人腦動(dòng)脈血管內皮細胞*培養基100mL

異常漢遜酵母 Hansenula anomala馬克斯克魯維酵母 Kluyveromyces marxianus

WTRL1(大鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2

大鼠腺上皮細胞*培養基100mL

MRC5/成纖維細胞株國產(chǎn)gersion

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis野油菜黃單胞菌 Xanthomonas campestris

灰色裂孢鏈霉菌 Streptomyces griseosegmentosus

ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

雞貧血病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格小紅酵母 Rhodotorula MiuntaA2(人腺樣囊性細胞)

爪哇正青霉 Eupenicillium javanicum炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

藍色預染中分子量蛋白Marker費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞KATO III(人胃細胞)

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna腐皮鐮孢 Fusarium solani

KiMA(人胚腎上皮細胞系)肺

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

雅致放射毛霉 Actinomucor elegans蟲(chóng)草 Cordyceps sp.

大鼠胎兒成纖維細胞*培養基小鼠牙細胞*培養基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人臍靜脈內皮細胞*培養基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna保加利亞桿菌 Lactobacillus bulgaricus

CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)BC3H1(小鼠腦瘤細胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum酒假絲酵母 Candida kefyr

根瘤菌 Rhizobium sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum