注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

泊金甲 CAS 99-76-3 *  規格： 20mg

異甾苷 CAS 61303-13-7 *  規格： 20mg

雷公藤內酯甲 CAS 84104-71-2 *  規格： 20mg

6-姜烯酚 CAS 555-66-8 *  規格： 20mg

柯皂苷元（95%） CAS 467-55-0 *  規格： 20mg

古倫賓 CAS  *  規格： 20mg

番瀉苷C CAS 37271-16-2 *  規格： 10mg

莪術(shù)醇 CAS 4871-97-0 *  規格： 20mg

冬凌草甲素 CAS 28957-04-2 *  規格： 20mg

大黃酸 CAS 478-43-3 *  規格： 20mg

射干苷 CAS 611-40-5 *  規格： 20mg

耐斯糖 CAS 13133-07-8 *  規格： 20mg

蝙蝠葛蘇林堿 CAS 70553-76-3 *  規格： 20mg

苯 CAS 65-85-0 *  規格： 20mg

格洛苷C CAS 115909-22-3 *  規格： 20mg

節桿菌通用PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家植物桿菌 Lactobacillus plantarum異常漢遜酵母 Hansenula anomala

趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)重組蛋白  Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)

胰淀素(IAPP)重組蛋白  Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

大腸桿菌 Escherichia coli毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

粒細胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白  Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)

去氫膽酸/脫氫膽酸/3,7,12-三氧-5β-膽烷酸/Dehydrocholic acidBR，98.5%10/100/500克國產(chǎn)/進(jìn)口

 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖)10mL

大鼠肝細胞人內膜上皮細胞*培養基

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia異型德克酵母 Dekkera anomala

線(xiàn)粒體外膜轉位酶70A(TOMM70A)重組蛋白  Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實(shí)驗中發(fā)現，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應用，并逐步應用于臨床。