Calu-3人肺腺癌 （胸水）注意事項：

1)細胞漂?。号囵B瓶不開(kāi)封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀(guān)察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養液培養觀(guān)察，細胞生長(cháng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀(guān)察，我們的技術(shù)人員會(huì )一直跟蹤指導，直到問(wèn)題解決。

2)對于生長(cháng)緩慢的貼壁細胞：可采用適當的提高培養基中血清濃度，或隔日換液的方法來(lái)保證細胞的狀態(tài)和生長(cháng)速度。

3)對于生長(cháng)不均的貼壁細胞：在培養過(guò)程中若出現細胞分布明顯不均時(shí)（即某一區域細胞已重疊生長(cháng)，而旁邊則為一塊空白），此時(shí)可將細胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養基進(jìn)行培養。 

實(shí)驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25% 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個(gè) 

4、滅菌培養皿1個(gè)，細胞培養瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細胞計數板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；