大鼠冠狀動(dòng)脈組織提取物注意事項;
1. 接收到,肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色,顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況,并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照(建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴格無(wú)菌操作,打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進(jìn)行培養,如無(wú)法立刻進(jìn)行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養瓶充滿(mǎn)*培養基后進(jìn)行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
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