植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒操作步驟：
1. 樣品的準備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝su鈉) 灌流血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細胞和組織的差異會(huì )比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻獑?dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說(shuō)明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽(yáng)性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個(gè)組分，注意設置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應啟動(dòng)工作液后反應即會(huì )開(kāi)始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動(dòng)工作液的時(shí)間先后差異而導致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說(shuō)明：孵育25至35分鐘檢測出來(lái)的SOD活力無(wú)顯著(zhù)差異，但為檢測結果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無(wú)450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長(cháng)作為參考波長(cháng)進(jìn)行雙波長(cháng)測定。
4. 樣品中總SOD活力的計算：
a. 百分率的計算：
參考如下計算公式計算百分率：
百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒(méi)有設置空白對照3，則可以把計算公式簡(jiǎn)化為：
百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計算出來(lái)的百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的百分率在30-70%范圍內。如果測定出來(lái)的百分率偏高，則需適當稀釋樣品；如果測定出來(lái)的百分率偏低，則需重新準備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應體系中百分率為50% 時(shí)，反應體系中的SOD酶活力定義為一個(gè)酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據其定義的不同進(jìn)行適當換算。